1. materiale sperimentale
(1) Carta Bacillus stearothermophilus (è disponibile anche una serie di provette vendute da 3M Company). Bacillus stearothermophilus.
ATCC7053 è un batterio indicatore biologico comunemente usato in questo metodo, contenente una CFU/compressa a 5 cellule.
(2) Scheda indicatore chimico per sterilizzazione a vapore a pressione di 121 ° C (è disponibile anche un comune nastro indicatore di sterilizzazione).
(3) Il mezzo acquoso di bromocresolo purpura è stato autoclavato a 116°C per 20 minuti e quindi utilizzato (come la provetta venduta da 3M Company, questo mezzo non può essere utilizzato).
(4) Termometro residuo O-150 °C (taratura richiesta dall'ufficio metrologico).
2. Metodo e risultato
La carta Bacillus stearothermophilus (di seguito denominata compressa batterica) è stata posta in una provetta sigillata con una pinza sterile. La scheda dell'indicatore chimico e il termometro spot sono posti in una provetta aperta. Preparare 5-10 parti di ciascuno dei due tubi sopra. Posizionarli alla porta del vapore dell'autoclave, alla porta di scarico inferiore e all'uscita dell'acqua inferiore o al centro della parte superiore, inferiore, sinistra e destra. Se lo sterilizzatore è al secondo piano, devi mettere 10 posti.
Il restante termometro può essere utilizzato per il test di verifica dopo che è stato standardizzato. Prima del test, la colonna di mercurio del termometro deve essere frantumata a una temperatura inferiore a 40 °C. La differenza di temperatura del termometro dopo ogni monitoraggio dovrebbe essere compresa tra 1 °C, a indicare che la distribuzione della temperatura all'interno dello sterilizzatore è uniforme.
La placca sterilizzata deve essere coltivata a 56-60°C per 24-48 ore in condizioni asettiche sterili in mezzo di acqua purinica di bromocresolo sterilizzato per osservare il cambiamento di colore. Se il terreno diventa giallo, il B. stearothermophilus nella compressa non è completamente inattivato e i batteri possono ancora crescere nel terreno e il glucosio viene decomposto per produrre acido in giallo. Se il colore del terreno non cambia, è ancora viola, indicando che le spore sono state inattivate. Allo stesso tempo, la carta non sterilizzata è stata posta nel mezzo come controllo positivo e il mezzo bianco senza carta è stato usato come controllo negativo.
Il colore dell'indicatore sulla scheda dell'indicatore chimico cambia da giallo chiaro a nero durante la sterilizzazione in autoclave. Quando il colore cambia in profondità e confrontato con il colore di controllo, si può giudicare se l'effetto di sterilizzazione soddisfa i requisiti. La scheda dell'indicatore chimico deve essere conservata in un luogo asciutto. Cambierà colore se esposto all'umidità, il che influenzerà l'osservazione dell'effetto di sterilizzazione.
La sterilizzazione a vapore ad alta pressione deve consentire al vapore di entrare senza problemi nello sterilizzatore, entrare in contatto con gli articoli sterilizzati e scaricare l'aria fredda originale per ottenere l'effetto di sterilizzazione. Devono essere eseguite la verifica della distribuzione del calore a vuoto e della penetrazione termica a pieno carico (non più di 2/3 del volume totale a pieno carico). Le due verifiche sono state ripetute tre volte per un totale di sei volte.
Cinque punti e sei test hanno mostrato che la temperatura era a 121 ° C, la scheda dell'indicatore chimico è diventata nera; il grado era coerente con il colore di controllo; il mezzo non ha cambiato colore, indicando che l'effetto di sterilizzazione a vapore ad alta pressione è stato qualificato.
Le autoclavi sono strumenti potenti, ma le ispezioni forti sono solo un esame dei parametri fisici dello strumento. Pertanto, la sterilizzatrice che è stata sottoposta alla forte ispezione deve verificare anche l'effetto della sterilizzazione. Alcune unità spesso trascurano questo importante problema. Negli sterilizzatori portatili domestici, la lancetta dello strumento raggiunge spesso la temperatura richiesta, ma la temperatura effettiva dell'articolo sterilizzato non soddisfa i requisiti. Portare a oggetti sterilizzati non è completo, influenzando i risultati dell'esperimento. Il terreno non viene sterilizzato a fondo, compromettendo l'uso del terreno e giudicando i risultati. Pertanto, la verifica dell'effetto asettico dell'autoclave è un problema che deve essere preso sul serio.
Quando si utilizza uno sterilizzatore a vapore ad alta pressione, assicurarsi innanzitutto di rimuovere l'aria fredda dallo sterilizzatore durante l'apertura del vapore. Il foro di sfiato deve essere chiuso prima che tutta l'aria fredda nell'unità sia stata rimossa.
Se rimane dell'aria nella sterilizzatrice, il manometro ha raggiunto un certo valore di pressione, ma la temperatura all'interno del dispositivo non ha raggiunto il grado corrispondente. Più aria rimane, maggiore è la differenza tra le due, la temperatura all'interno del dispositivo è insufficiente e la sterilizzazione non è completa. (Molte persone avranno delle bolle nel catetere piccolo quando vengono sterilizzate nel mezzo di fermentazione. Potrebbe anche essere possibile provare a scaricare più aria fredda dallo sterilizzatore. Ha un effetto miracoloso).