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Quali fattori dovrebbero essere considerati nella scelta di uno spettrofotometro UV

2022-07-12 13:39:41
La spettrofotometria viene spesso utilizzata nelle misurazioni delle attività enzimatiche, nelle determinazioni delle concentrazioni proteiche, nelle determinazioni delle costanti cinetiche enzimatiche e nelle misurazioni delle reazioni di legame del ligando.

Gli spettrofotometri UV sono ampiamente utilizzati nella ricerca di chimica organica. Solitamente utilizzato per l'identificazione di sostanze, il controllo della purezza e la ricerca della struttura molecolare organica. In termini di quantificazione, è possibile determinare il contenuto di ciascun componente in composti e miscele con strutture complesse. Può anche misurare la costante di dissociazione della sostanza, la costante di stabilità del complesso, l'identificazione del peso molecolare della sostanza e il punto finale di indicazione nella microtitolazione e come rivelatore nella cromatografia liquida ad alte prestazioni.


Scelta dello spettrofotometro UV:

Quando scegliamo vari strumenti, ci sono determinati criteri, come l'accuratezza della misurazione o l'intervallo di misurazione. Quando scegliamo uno spettrofotometro UV, prendiamo in considerazione la costruzione ottica, la gamma spettrale, il tipo di campione e gli strumenti analitici.

La struttura ottica si riferisce principalmente al fatto che la luce emessa dallo spettrofotometro UV sia un raggio singolo o un doppio raggio. Il raggio singolo viene misurato da un singolo raggio di luce, la lunghezza d'onda viene fornita durante il processo di misurazione, quindi i risultati dell'assorbanza vengono ottenuti attraverso l'oggetto misurato e l'oggetto di controllo. La doppia trave è divisa in due da una ruota chopper.

Le sorgenti luminose includono la luce infrarossa, ultravioletta e visibile. Le lampade al tungsteno e alogene generalmente coprono solo la parte di luce visibile. La lampada allo xeno può coprire le regioni di luce ultravioletta e visibile.

Gli spettrofotometri UV-vis in genere utilizzano tubi fotomoltiplicatori e fotodiodi per misurare l'assorbanza.

Lo spettrofotometro UV accetta pozzetti per campioni, cuvette, pipette e micropiastre per la maggior parte dei tipi di campioni.

La maggior parte degli spettrofotometri UV autonomi include un software che guida lo strumento e gestisce i dati. Gli strumenti ad alte prestazioni, solitamente utilizzati insieme a un PC, richiedono un software aggiuntivo del produttore. Allo stesso tempo, gli utenti possono anche scegliere di aggiornare il software per soddisfare le proprie esigenze.

Il principio di funzionamento di base dello spettrofotometro UV:

Lo spettrofotometro UV utilizza una certa frequenza della luce UV-visibile per irradiare la sostanza organica analizzata, provocando la transizione degli elettroni di valenza nella molecola, che verranno assorbiti selettivamente. Un insieme di spettri il cui assorbimento varia con la lunghezza d'onda, riflettendo le caratteristiche del campione. Nell'intervallo della luce ultravioletta e visibile, per una specifica lunghezza d'onda, il grado di assorbimento è proporzionale alla concentrazione del componente nel campione, quindi lo spettro misurato può essere analizzato qualitativamente e in base al confronto dell'assorbimento con uno standard campione di concentrazione nota, può anche essere analisi quantitativa.


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