I. Funzionamento: Creazione di un ambiente anaerobico
1. Regolazione della pressione di uscita dell'azoto e delle bombole di gas combinato: Regolare la valvola di riduzione della pressione a circa 0,1 MPa.
2. Accendere l'interruttore di alimentazione e il regolatore di temperatura, impostando la temperatura desiderata. La temperatura all'interno dell'incubatore, nella camera operativa, può essere selezionata e controllata a piacere.
3. Posizionare gli accessori e le attrezzature necessarie in base alle esigenze di utilizzo e inserire due sacchetti di plastica atossici nella camera operativa.
4. Introdurre nella camera operativa 1000 g di granuli di palladio essiccati (sigillati) e 500 g di essiccante, insieme a un indicatore anaerobico (sigillato).
5. Chiudere ermeticamente le porte interna ed esterna della camera di campionamento ed eseguire una verifica del vuoto.
6. Sostituzione secondaria dell'azoto nella camera operativa:
(1) Inserire un tubo di gomma nell'ingresso dell'aria della camera operativa e inserire l'altra estremità in un sacchetto di plastica.
(2) Collegare l'ingresso dell'azoto, aprire la valvola di controllo dell'azoto, riempire entrambi i sacchetti di plastica con azoto e quindi chiudere ermeticamente le aperture dei sacchetti.
(3) Indossare guanti in lattice sull'anello flangiato del pannello di osservazione e fissarli saldamente.
(4) Rilasciare gradualmente l'azoto dai sacchetti di plastica nella camera operativa fino a completo rilascio.
7. Sostituzione secondaria dell'azoto nella camera operativa: Ripetere la procedura di riempimento con azoto, prestando attenzione ad aprire e chiudere la valvola di scarico in qualsiasi momento.
8. Sostituzione terziaria della miscela di gas nella camera operativa:
(Composizione della miscela di gas: N2 90%; H2 5%; CO2 5%).
(1) Modificare il percorso del gas, aprire la valvola di ingresso della miscela di gas e aprire e chiudere la valvola di scarico in qualsiasi momento durante il riempimento.
(2) Dopo che la miscela di gas ha riempito i sacchetti di plastica, chiudere la valvola di passaggio della miscela di gas (valvola a tre vie).
(3) Rilasciare gradualmente la miscela di gas dai sacchetti di plastica nella camera operativa.
(4) Dopo tre ricambi d'aria, il contenuto di ossigeno nella camera operativa si riduce a tracce.
9. Accendere il dispositivo di rimozione dell'ossigeno a granuli di palladio nella camera operativa e collegare l'alimentazione al dispositivo di deossigenazione catalitica dell'ossigeno. Dopo un'ora, osservare il cambiamento di colore della striscia indicatrice anaerobica. Un cambiamento di colore indica che la camera operativa ha raggiunto un ambiente anaerobico.
10. Accendere la lampada di sterilizzazione a raggi ultravioletti per sterilizzare la camera. Il tempo di sterilizzazione è determinato dall'utente.
II. Inserimento e coltura dei ceppi batterici
1. Controllare e chiudere lo sportello della camera di campionamento.
2. Aprire lo sportello esterno della camera di campionamento, introdurre il ceppo batterico nella camera e quindi chiudere lo sportello esterno.
3. Eseguire tre cicli di spurgo e sostituzione dell'azoto nella camera di campionamento: innanzitutto, creare un vuoto di 500 mmHg (66 kPa) o superiore, quindi aprire manualmente la valvola dell'azoto per consentire all'indicatore di tornare a zero prima di procedere all'operazione successiva.
4. Se si seleziona un livello di vuoto inferiore, è necessario aumentare il numero di cicli di sostituzione.
5. Dopo aver aperto e chiuso gli sportelli della camera di campionamento, applicare un vuoto parziale di 100 mmHg (13 kPa) per ispezione e assistenza.
6. Condizioni per l'uso continuo a lungo termine dell'incubatore anaerobico:
(1) Osservare quotidianamente la barra indicatrice di anaerobiosi nella sala operatoria. Se l'aria è normale, può continuare ad essere utilizzata. In caso di anomalie, è necessario sostituirla.
(2) Una piccola quantità di miscela gassosa deve essere introdotta continuamente per garantire che l'idrogeno aggiunto si combini con tracce di ossigeno per l'assorbimento catalitico, mantenendo un ambiente anaerobico. La portata della miscela gassosa deve essere di circa 10 ml al minuto.
(3) Sostituire l'essiccante ogni 3 giorni di incubazione continua.
7. Applicazione dello sterilizzatore per bacchette di inoculo:
(1) Utilizzare un filo riscaldante in nichel-cromo per cortocircuitare e riscaldare la bacchetta di inoculo fino a renderla incandescente.
(2) Il punto di fusione della cera può essere posizionato direttamente sulla bacchetta di inoculo e l'apertura di cera della provetta può essere ruotata per sciogliere la cera.